В третьей части приключений Ларри Дэйли, который уже давно привык к тому, что после закрытия музея его экспонаты оживают, наступают непростые времена. Магическая древнеегипетская золотая пластина, отвечающая за волшебство, которое возвращает к жизни истуканы, скелеты и даже доисторические существа, начинает разрушаться.
Режиссёр Брайан Левант создал проект, который быстро стал одним из самых любимых семейных фильмов нулевых, основанный на неожиданной, но невероятно удачной идее: после заката в музее естественной истории оживают все экспонаты. Главный герой, Ларри Дэлей, устраивается на работу ночного сторожа, чтобы заработать на содержание сына и доказать бывшей жене, что он может быть надёжным отцом.
История вращается вокруг эксцентричной мисс Вики, представительницы старой американской аристократии, которая привыкла жить на широкую ногу и считать себя одним из самых щедрых филантропов в мире. Ее семейное состояние давно исчерпано, но ни она, ни ее окружение не могут представить себе жизнь без привычных роскоши и благотворительных проектов, которые она регулярно анонсирует публике.